BÀI 1: CÔNG NGHỆ TẾ BÀO THỰC VẬT VÀ THÀNH TỰU
I. TÍNH TOÀN NĂNG CỦA TẾ BÀO
- Khái niệm:
Tính toàn năng của tế bào là đặc tính của tế bào có khả năng phân chia, biệt
hoá thành các loại tế bào khác nhau và phát triển thành một cơ thể hoàn chỉnh
trong điều kiện thích hợp.
- Cơ sở khoa học:
+ Tế bào toàn năng chứa hệ
gene mang đầy đủ thông tin di truyền của cơ thể sinh vật đó.
+ Khi gặp điều kiện thích hợp,
các gene này sẽ được kích hoạt biểu hiện để định hướng tế bào phát triển thành
cơ thể mới.
- Ý nghĩa:
Là nền tảng lý thuyết cốt lõi cho toàn bộ công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật.
Ví dụ thực tế: Cây
hoa bỏng (lá bỏng) có khả năng sinh sản vô tính cực kỳ kỳ diệu. Khi một lá cây
rơi xuống đất ẩm, tại các mép lá sẽ mọc ra rất nhiều cây con hoàn chỉnh (có đầy
đủ rễ, thân, lá). Điều này minh họa trực quan cho tính toàn năng: mỗi tế bào ở
mép lá vẫn giữ nguyên vẹn thông tin di truyền và khả năng biệt hóa để tạo nên một
cơ thể mới giống hệt cây mẹ khi gặp điều kiện thuận lợi.
II. QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ TẾ BÀO THỰC VẬT
- Khái niệm:
Là quy trình kĩ thuật nuôi cấy mô, tế bào trong môi trường dinh dưỡng nhân tạo ở
điều kiện vô trùng để tế bào phân chia, phát triển thành cây hoàn chỉnh.
- Quy trình chung (vi nhân giống):
Gồm 3 giai đoạn chính:
+ Chuẩn bị môi trường dinh dưỡng:
+ Môi trường chứa các chất
dinh dưỡng thiết yếu (đường, muối khoáng, vitamin) và hai nhóm hormone thực vật
quan trọng là auxin và cytokinin.
+ Toàn bộ dụng cụ và môi
trường nuôi cấy phải được khử trùng nghiêm ngặt trước khi sử dụng để
tránh nhiễm nấm, vi khuẩn.
+ Khử trùng mô nuôi cấy:
+ Mẫu mô lấy từ cơ thể mẹ
(explant) phải được khử trùng bề mặt bằng các chất sát trùng nhẹ (như cồn, nước
Javel) trước khi cấy vào môi trường dinh dưỡng.
+ Tái sinh cây:
+ Mẫu cấy được đặt trong điều
kiện nhiệt độ và chế độ chiếu sáng thích hợp.
+ Tế bào phân chia tạo ra
khối tế bào chưa phân hoá gọi là mô sẹo (callus).
+ Điều chỉnh tỉ lệ hormone
để tế bào mô sẹo biệt hoá thành các cơ quan (chồi, rễ) và phát triển thành cây
con hoàn chỉnh.
+ Thời gian nuôi cấy thông
thường kéo dài từ 6 đến 8 tuần tùy loài.
Để điều khiển mô sẹo phát triển theo ý muốn, các nhà
khoa học điều chỉnh tỉ lệ hormone theo bảng dưới đây:
|
Tỉ
lệ Auxin / Cytokinin |
Hướng
phát triển của mô |
Ứng
dụng thực tiễn |
|
Cân bằng (Auxin \approx Cytokinin) |
Tế bào phân chia liên tục tạo mô sẹo (callus) |
Nhân nhanh sinh khối tế bào chưa biệt hóa |
|
Thấp (Auxin < Cytokinin) |
Kích thích tế bào mô sẹo biệt hoá tạo chồi |
Phát triển hệ thống thân và lá |
|
Cao (Auxin > Cytokinin) |
Kích thích mô sẹo hoặc chồi biệt hoá tạo rễ |
Hoàn thiện hệ rễ để tạo cây con hoàn chỉnh |
III. MỘT SỐ THÀNH TỰU VÀ TRIỂN VỌNG CỦA
CÔNG NGHỆ TẾ BÀO THỰC VẬT
1. Nhân giống bảo tồn các giống cây quý hiếm
- Giúp nhân nhanh các loài
cây có nguy cơ tuyệt chủng, khôi phục nguồn gene thực vật quý hiếm.
- Giúp tạo ra các giống cây
sạch bệnh virus từ tế bào đỉnh sinh trưởng.
2. Nhân giống nhanh với số lượng lớn
- Thích hợp cho các loài
cây thân gỗ, cây ăn quả có chu kỳ sinh trưởng dài, khó nhân giống bằng phương
pháp truyền thống (gieo hạt, chiết, giâm cành).
- Đem lại hiệu quả kinh tế
cực kỳ cao cho ngành lâm nghiệp và cây ăn quả xuất khẩu nhờ tạo ra lượng cây giống
đồng đều về di truyền trong thời gian rất ngắn.
Ví dụ thực tế:
Các nông trại trồng chuối xuất khẩu quy mô lớn hiện nay hoàn toàn sử dụng giống
chuối nuôi cấy mô. Do cây con được sản xuất đồng loạt trong phòng thí
nghiệm nên khi trồng ra ruộng, chúng sẽ sinh trưởng đều như nhau, ra buồng và
chín cùng một thời điểm, giúp nông dân dễ dàng thu hoạch hàng loạt bằng máy móc
và đóng gói xuất khẩu đạt tiêu chuẩn đồng đều.
3. Tạo giống mới
- Thiết lập hệ thống tái
sinh in vitro kết hợp kỹ thuật chuyển gene tạo cây trồng biến đổi gene
(GMO) mang các đặc tính quý: kháng sâu bệnh, kháng thuốc diệt cỏ, chịu hạn mặn
hoặc tăng hàm lượng dinh dưỡng.
- Ứng dụng nuôi cấy hạt phấn
đơn bội (n) sau đó xử lý bằng tác nhân hoá học (colchicine) để tạo ra các cây
lưỡng bội (2n) đồng hợp tử về tất cả các gene, rút ngắn thời gian chọn giống.
Ví dụ thực tế:
Giống Lúa Vàng (Golden Rice) là một thành tựu vĩ đại của công nghệ sinh
học thực vật. Các nhà khoa học đã chuyển gene tổng hợp beta-carotene (tiền chất
tạo ra Vitamin A) từ cây hoa thuỷ tiên vào bộ gene của lúa. Hạt gạo tạo ra có
màu vàng óng, giúp bổ sung Vitamin A cho trẻ em nghèo ở các quốc gia đang phát
triển châu Á, ngăn ngừa bệnh mù lòa và suy giảm hệ miễn dịch do thiếu hụt dinh
dưỡng.
4. Triển vọng của công nghệ tế bào thực vật
- Kết hợp chặt chẽ với công
nghệ di truyền để tạo đột phá trong nông nghiệp toàn cầu nhằm giải quyết bài
toán an ninh lương thực (dự báo của FAO: thế giới cần thêm 70% lương thực vào
năm 2050).
- Dự án quốc tế về phát triển
giống lúa C₄ bằng cách chuyển gene quang hợp hiệu suất cao từ cây ngô
sang cây lúa nước (C₃), giúp tăng năng suất lúa lên gấp rưỡi và tiết kiệm nước
tưới.
- Nuôi cấy tế bào thực vật
trong các hệ thống lên men sinh học (bioreactor) để thu nhận trực tiếp các chất
có hoạt tính sinh học quý làm thuốc, mỹ phẩm mà không cần trồng cả cây ngoài tự
nhiên.